高效毛细管电泳色谱仪电动进样技术女鞋
山和机械网 2022-09-09 18:25:11
高效毛细管电泳色谱仪电动进样技术
高效毛细管电泳色谱仪电动进样是当在毛细管的进样端浸入样品溶液并加上电场E时,组分因电泳和电渗作用而进入毛细管内。由于毛细管内径很小,对进样技术要求很高,进样区带宽度约是毛细管柱长的1%~2%,不能引入显著的区带扩张,以确保系统的高效;样品量必须<100nL,否则易造成过载。一、进样方法:毛细管洗净后,用微量注射器注入缓冲液,然后将其两端分别浸入两个盛有缓冲液的储瓶。电动进样时,将含样品溶液的储瓶代替一端的缓冲液储瓶,通过样品溶液引入进样电压(为分离电压的1/5~1/3),电路按一定时间周期接通,一般是几秒钟接通一次,使进入毛细管的样品区带变窄。然后断电,将缓冲液储瓶代替样品溶液瓶,再通入高压电,使电泳开始。为使电压沿管线分布均匀,应使样品溶液与缓冲液的电导率相近。二、进样质量:电动进样时,在时间t内,进入毛细管的样品质量Q为:Q =πr2(vep + veo)Ct= πr2(μep + μeo)ECt= πr2(μep + μeo)VCt/L式中:r为毛细管内径,V为毛细管两端的电压,L为毛细管总长度,C为样品浓度。电动进样的控制参数是电场强度E和进样时间t。其中E通常为1~10kV/60cm;t通常为1~10s,有时可达60s或更大。三、特点:1、优点:(1)电动进样对毛细管内的填充介质没有限制,属普适性进样方法,可实现自动化操作。(2)进样装置简单。(3)适用于荷电样品进样,特别适合粘度大的样品。(4)电动进样是毛细管凝胶电泳的唯一进样方式。因为在凝胶状态下,压力进样和扩散进样都很困难。(5)可用于痕量富集。但样品溶液的离子强度必须保持恒定,否则在该点的电压会急剧变化。2、缺点:电动进样对离子组分存在偏向,淌度大的离子比淌度小的离子的进样量大,淌度大且与电渗流方向相反的离子可能进不去,而降低分析的有效性和可靠性。
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